人肥大细胞类胰蛋白酶(MCT)Elisa试剂盒吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体,适用多种标本类型并节约成本。其高效、灵敏、特异的抗体与高效、灵敏、特异的抗体使实验曲线更*。是一款可以让您放心选购的ELISA试剂盒产品。
规格:48次,96次
检 测 范 围 :7pg/ml-220pg/ml
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000
转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,
在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
人肥大细胞类胰蛋白酶(MCT)Elisa试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这
属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为0 的S0 号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5
倍,zui终结果乘以5 才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20 稀释,即1 份的20×洗涤缓冲液加19 份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min 后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍
干,如此洗板5 次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5 次。
人肥大细胞类胰蛋白酶(MCT)Elisa试剂盒操作步骤
1. 从室温平衡20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗原100
μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,
如此重复洗板5 次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B 各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min 内,在450nm 波长处测定各孔的OD 值。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel 工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD 值作纵坐标,绘制出
标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
人肥大细胞类胰蛋白酶(MCT)Elisa试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R 值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:zui低检测浓度小于0.1 U/ml。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6 个月
免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验
者承担,本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
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